1. 
      
          產品中心
          當前位置: 首 頁 > 產品中心 > 小鼠細胞系

          67NR 小鼠乳腺癌細胞

          英文名稱: 67NR

          產品編號: CL-142m

          價格: ¥2300

          規格:
          1×10?cells
          數量: - +

          詳細介紹

          67NR 小鼠乳腺癌細胞

          產品編號:CL-142m

          細胞特性

          含量:>1x106cells;

          生長特性:貼壁生長;

          細胞形態:上皮細胞樣,短梭形,多角形,邊緣不規則,單層貼壁生長

          規格:T25瓶或者2mL凍存管包裝;

          用途:僅供科研使用。

          細胞運輸、保存及注意事項


          復蘇細胞

          凍存細胞

          包裝

          充液的T25細胞培養瓶

          2mL凍存管

          運輸條件

          常溫

          干冰

          保存方式

          75%酒精消毒瓶壁,置于37℃恒溫細胞培養箱

          -80℃冰箱中保存過夜后轉入液氮/立即復蘇

          注意事項

          ① 收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們;

          ② 請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照,10X20X2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據;

          ③ 貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在運輸過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收;

          ④ 運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶12傳代。

           培養條件

          完全培養基

          RPMI-1640完全培養基:90%RPMI-1640+10%FBS

          培養條件

          培養溫度37℃;氣體環境5%CO2+95%空氣;

          凍存液

          50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO

          細胞復蘇、傳代、凍存操作

          一、細胞復蘇:

             ① 凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內全部溶解為宜;

             ②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養基的離心管內,1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完全培養基重懸細胞;

             ③將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養基的T25瓶中,放入培養箱培養。

          二、細胞傳代:

             ①將舊培養液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);

             ②鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散;

            ③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當的完全培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養;

             ④注意培養基pH值變化和細胞密度,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%-90%時,重復傳代操作或者凍存。

          三、細胞凍存:

          收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例:

            ① 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

            ② 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

            ③將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

           

          注意事項:

            ①所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

            ②建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。


          服務熱線:400-027-5700

          地址:湖北省武漢市東湖高新技術開發區光谷三路778號

                    自貿生物創新港9層

          郵箱:service@51cells.cn

          官方公眾號

          COPYRIGHT BY ? 2021 武漢賽奧斯生物科技有限公司 鄂ICP備2021018852號-1
        1. QQ咨詢
        2. 熱線電話

          400-027-5700

        3. 在線留言
        4. 聯系郵箱
          sales@51cells.cn
        5. 網站首頁
        6. 咨詢電話
        7. 返回頂部
        8. 兩周內免登錄
          亚洲无码网站_亚洲成a人片在线观看无码动态图_99偷拍视频精品一区二区_中文精品久久久久人妻不卡免费
            1.