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          K7M2wt 小鼠骨肉瘤成骨細胞

          英文名稱: K7M2wt

          產品編號: CL-157m

          價格: ¥1500

          規格:
          1×10?cells
          數量: - +

          詳細介紹

          K7M2wt 小鼠骨肉瘤成骨細胞

          產品編號:CL-157m

          細胞介紹

          抗原表達: CD31 陽性 [PubMed:1315100] 產物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達顯示其骨家族細胞特性。在本庫通過支原體檢測。

          細胞特性

          來源:BALB/c 器官: 骨 疾病: 骨肉瘤 來源轉移灶: 肺 細胞類型: 成骨細胞

          形態:成骨細胞   貼壁生長

          含量:>1x10?cells

          規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

          用途:僅供科研使用

          細胞運輸、保存及注意事項


          復蘇細胞

          凍存細胞

          包裝

          充液的T25細胞培養瓶

          1mL凍存管

          運輸條件

          常溫

          干冰

          保存方式

          75%酒精消毒瓶壁,置于37恒溫細胞培養箱

          -80℃冰箱中保存過夜后轉入液氮/立即復蘇

          注意事項

          ① 收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁,T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們;

          ② 請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照,10X20X2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據;

          ③ 貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收;

          ④ 運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶 12傳代。

          培養基及培養凍存條件準備:

          完全培養基

          DMEM培養基+優質胎牛血清,10%+ 雙抗1%

          培養條件

          氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%;溫度:37;培養箱濕度為70%-80%

          凍存

          90%血清 10%DMSO,現用現配


          細胞復蘇、傳代、凍存操作

          (一)細胞復蘇

          ① 新制 100mm 平皿 1個,含 12mL 上述培養液;

          ② 凍存管從液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入安全柜復蘇;

          ③ 用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,順時針搖勻;

          ④ 放入(37℃,5%CO2)培養箱中,過夜換液,2-4天長滿。

          注意:建議復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩,避免凍存管處于溫差較大情況下發生爆炸造成人員傷害。

          (二)細胞傳代

          將舊培養液吸除,PBS清洗兩遍后,加入2mL/100mm/T25瓶)胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA),在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養皿,細胞剛有脫落時,吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養箱消化,約1min取出。傳代用6mL培養液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可1:2傳代。

          (三)細胞凍存:

          凍存則用3mL凍存液(90% FBS+ 10% DMSO)終止消化,吹打均勻,分為3支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存。

          注意事項

          所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。



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